应用弓形虫截短型SAG1纳米金免疫传感器检测弓形虫抗体的研究

作者：张玉娟; 刘苗; 刘培; 刘娟; 任琪琪; 袁仕善^*

来源：中国病原生物学杂志, 2019, 14(06): 661-664.

DOI：10.13350/j.cjpb.190609

• 刚地弓形虫
• 截短型主要表面抗原1
• 弓形虫病
• 纳米金免疫传感器

目的克隆表达弓形虫主要表面抗原1截短型片段(tSAG1),建立tSAG1纳米金免疫传感器,用于检测弓形虫抗体。方法 PCR扩增tSAG1基因片段并克隆至pMD18-T载体,测序鉴定后亚克隆至表达载体pET-28a(+),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达tSAG1,金属螯合层析法进行纯化,Western blot分析其免疫活性;采用种子生长法制备金纳米棒,偶联tSAG1,构建纳米金免疫传感器,用于检测人血清弓形虫抗体,计算其敏感度、特异度、阳性及阴性预测值和诊断效率。结果构建了重组表达质粒pET-28a (+)-tSAG1,表达纯化获得具有反应原性的tSAG1,其相对分子质量约为30×103。用制备的tSAG1纳米金免疫传感器检测人血清弓形虫抗体的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及诊断效率分别为80.9%、90.0%、90.2%、80.6%和85.2%。结论基于重组tSAG1的纳米金免疫传感器可用于弓形虫抗体的检测。

• 单位
  湖南师范大学