miR-21靶向抑制TIMP3表达促进肝细胞肝癌细胞侵袭

作者：石慧; 蔡笃雄^*

来源：现代肿瘤医学, 2022, 30(05): 768-772.

DOI：10.3969/j.issn.1672-4992.2022.05.003

• 肝细胞肝癌
• 侵袭
• miR-21
• 组织金属蛋白酶抑制因子3

目的:探讨miR-21在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞中的表达及其调控细胞增殖和侵袭的机制。方法:通过Real-time PCR检测HCC细胞株(Hep3B、HuH7、SNU398和Hep3G2)和人正常肝细胞(THLE2、THLE3)中miR-21的表达。使用miR-21-inhibitor及对照miR-NC分别瞬时转染Hep3B和HuH7细胞,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。双荧光素酶实验检测miR-21与组织金属蛋白酶抑制因子3(tissue metalloproteinase inhibitor factor 3,TIMP3)的靶向结合关系;Western blot法检测TIMP3、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9的表达。结果:Hep3B、HuH7、SNU398和Hep3G2细胞中miR-21表达均高于THLE2、THLE3细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。Hep3B和HuH7细胞转染miR-21-inhibitor后细胞侵袭能力受到有效抑制(P<0.01),对细胞增殖没有显著影响。双荧光素酶实验结果显示,miR-21-mimic转染后,野生型质粒组荧光素酶活性显著降低,与miR-NC组相比,差异均有统计学意义(P<0.01);突变质粒组,miR-21-mimic对其荧光素酶活性没有显著影响,与miR-NC组相比,差异也不显著。miR-21-inhibitor转染组Hep3B和HuH7细胞中TIMP3表达均升高,MMP2和MMP9的表达降低,与miR-NC相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-21能够通过靶向抑制TIMP3表达,进而上调MMP2和MMP9的表达与活化促进HCC细胞侵袭。

• 单位
  海南医学院第一附属医院