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摘要
目的:研究骨桥蛋白(OPN)不同剪接变体在三株人肺癌细胞系A549、NCI-H209和95-D中的表达情况及其对肺癌细胞增殖、侵袭转移的影响。方法:RT-PCR和Western blot方法检测OPN不同剪接变体在三株肺癌细胞系中的mRNA和蛋白水平。构建不同OPN剪接变体的瞬时转染细胞。软琼脂克隆形成实验、细胞侵袭及划痕实验观察不同OPN剪接变体转染的A549细胞体外增殖、侵袭以及转移能力。结果:在三株肺癌细胞系中,OPN有3种剪接变体形式表达,A549和NCI-H209细胞中OPN-a和OPN-b的mRNA水平高于OPN-c,OPN-c的mRNA水平在95-D细胞中最高。Western blot也进一步发现三种剪接变体在三株肺癌细胞系中表达,三种剪接变体的蛋白表达水平与mRNA水平不一致,主要以OPN-a形式高表达。瞬转三种剪接变体至A549细胞,发现瞬转OPN-a和OPN-b可以更有效的促进A549细胞的增殖,而OPN-b和OPN-c对侵袭能力促进更明显,但是OPN-c更有效促进细胞迁移。结论:不同OPN剪接变体形式在肺癌细胞中的表达水平不同,其对肿瘤的生物学行为影响也不同。鉴定特异的OPN剪接变体可更有效的为评价肿瘤生长及转移提供参考指标。
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单位中国人民解放军一一七医院
