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摘要
目的比较不同蒸制时间的酒萸肉指标性化学成分含量,探讨不同蒸制时间的酒萸肉醇提物对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)间质转分化及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达的影响,结合两者评价蒸制时间对酒萸肉品质的影响。方法运用HPLC-DAD法对没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、山茱萸新苷进行含量测定。采用Waters Symmetry C18反相色谱柱,流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长240 nm,柱温35℃。体外药效实验分为空白对照组、TGF-β1组(10 ng·mL-1)、TGF-β1(10 ng·mL-1)+不同蒸制时间的酒萸肉醇提物冻干粉溶液组(1 mg·mL-1),培养48 h后,倒置光学显微镜下观察各组细胞形态学的差异,并采用Western-Blot法检测α-SMA蛋白的表达水平。结果蒸制时间对没食子酸、5-羟甲基糠醛、马钱苷、山茱萸新苷的含量均有显著影响,莫诺苷和獐牙菜苷较为稳定,与蒸制时间无明显的相关性。与空白对照组相比,TGF-β1组细胞胞体延长,呈长梭形,α-SMA的蛋白表达水平明显升高。给予不同蒸制时间的酒萸肉醇提物冻干粉溶液治疗后,细胞形态由长梭形逆转为鹅卵石样,同时α-SMA的蛋白表达水平均有降低,蒸制6 h后趋于稳定。结论所建酒萸肉指标性化学成分的含量测定方法及与体外药效相结合的研究,可为酒萸肉的品质评价奠定基础。
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