PDGF-R-2β胞外区基因的克隆和DNA疫苗的构建

作者：王俊; 吕凡; 邬文杰; 王雅杰

来源：临床儿科杂志, 2012, (10): 981-983.

DOI：10.3969/j.issn.1000-3606.2012.10.022

• DNA疫苗
• 血小板源性生长因子β受体
• 大鼠 DNA vaccine
• platelet-derived growth factor receptor beta
• rat

目的克隆鼠血小板源性生长因子β受体(PDGFR2β)胞外区基因序列,构建DNA疫苗。方法 TRIzol法提取SD仔鼠肝脏总RNA,RT-PCR法克隆PDGFR2β胞外区,回收目的基因,连接至pMDT-18载体,亚克隆法将目标基因片段连接入真核表达质粒pcDNA3.1( ),构建DNA疫苗pcDNA3.1( )-PDGFR2β。脂质体转染COS7细胞,Western-Blot法检测目标基因的表达。结果 PCR扩增长度为1599 bp的PDGFR2β基因胞外区片段,DNA自动测序证明所获基因片段序列阅读框架正确。将PDGFR2β连接入pcDNA3.1( )真核表达载体,构建PDGFR2β胞外区cD...

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院; 长海医院