摘要
【目的】研究辣椒光敏色素互作因子4(phytochrome-interacting factor 4, PIF4)响应盐胁迫的分子机制,对探究辣椒响应盐胁迫的分子机理和选育耐盐品种具有重要作用。【方法】以Zunla-1 cDNA为模板克隆CaPIF4,利用生物信息软件分析该基因所编码蛋白的理化性质,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术和病毒诱导基因沉默技术(virus induced gene silencing, VIGS)技术研究盐胁迫处理后CaPIF4表达模式及在盐胁迫中的作用。【结果】CaPIF4在辣椒根、茎、叶、花和果实各组织均有表达,但在叶片中表达水平最高;随着300 mmol/L NaCl处理时间的增加,CaPIF4表达量升高,其中,在处理2 h后表达量达到最高;利用VIGS技术沉默CaPIF4,将对照组(CK)和基因瞬时沉默组(pTRV-CaPIF4)进行300 mmol/L NaCl处理后发现,基因沉默组植株与空载组(CK)相比,萎蔫程度更为严重,说明基因瞬时沉默组(pTRV-CaPIF4)植株耐盐性降低;亚细胞定位结果显示,CaPIF4定位于细胞核;酵母转录活性分析发现CaPIF4具有转录激活活性。高盐胁迫下,辣椒叶片过氧化氢含量升高,过氧化物酶活性升高。染色结果显示,沉默CaPIF4后,导致H2O2和O2-含量显著升高。【结论】CaPIF4作为转录因子可能参与调控辣椒的盐耐受性。
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单位江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室; 江西农业大学; 江西省农业微生物资源开发与利用工程实验室