神经干细胞微囊泡抑制H2O2诱导DRG神经元氧化应激损伤机制研究

作者：唐彬; 万长春; 宗寿洋; 胡嘉波

来源：现代检验医学杂志, 2022, 37(04): 159-164.

• 神经干细胞
• 微囊泡
• 背根神经节
• 氧化应激
• 凋亡

目的 探究神经干细胞微囊泡(neural stem cell microvesicles, NSC-MVs)对H2O2诱导背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)神经元氧化应激损伤的作用及机制。方法 超速离心提取NSC-MVs，并进行电镜和纳米颗粒示踪分析。原代培养大鼠DRG神经元，β-tubulinⅢ荧光染色。建立H2O2诱导DRG神经元氧化应激损伤模型，确定作用浓度。经NSC-MVs预处理，MTT(四唑盐)检测神经元活力，流式细胞术检测AnnexinⅤ和PI，蛋白质印迹检测凋亡相关蛋白cleaved caspase 3,cleaved caspase 9,Bax和Bcl-2的表达。结果 NSC-MVs在透射电镜下呈圆盘状，包膜完整，纳米颗粒示踪显示其粒径为50～450 nm。MTT结果显示，与对照组相比，H2O2组神经元活力明显抑制。当H2O2浓度为25,50,100和200μmol/L时具有显著性差异，细胞活力分别为84.4%,73.7%,69.8%和49.5%(F=127.7,P <0.01)。经100,200和400μg/ml的NSC-MVs预处理DRG神经元，细胞活力得到明显提升，分别为51.4%,67.4%和73.5%(F=49.47,P=0.023)。流式细胞术检测结果显示，与对照组相比，H2O2组神经元凋亡率显著上升(P <0.05),NSCMVs预处理组细胞凋亡率明显下降(P <0.05)。蛋白质印迹结果显示，与H2O2组相比，NSC-MVs显著抑制cleaved caspase3,cleaved caspase 9和Bax蛋白表达(均P <0.05)，上调Bcl-2蛋白表达(P <0.05)。结论 NSC-MVs能够抑制H2O2诱导DRG神经元氧化应激损伤，发挥神经保护作用。

• 单位
  江苏大学; 金湖县人民医院