羊种布鲁菌强毒株和弱毒株对巨噬细胞影响的比较

作者：韩秀瑞; 田国忠; 姜海; 赵鸿雁; 赵忠智; 朴东日; 崔步云^*

来源：中华地方病学杂志, 2017, 36(05): 313-317.

• 布鲁杆菌属
• 毒力
• 巨噬细胞
• 细胞因子类

目的研究毒力不同的两种光滑型羊种布鲁菌在巨噬细胞内存活及诱导细胞因子能力的差异, 建立体外布鲁菌毒力检测方法。方法建立羊种布鲁菌强毒株16M和弱毒株M5侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞模型, 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测布鲁菌侵染后4、8、24 h, RAW264.7细胞上清培养液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-12的表达水平;涂平板计数法检测布鲁菌侵染后2、4、8、24、48 h, RAW264.7细胞内布鲁菌的数量变化。结果与对照组[(35.375 ± 1.132)、(35.907 ± 1.025)ng/L]比较, 布鲁菌16M和M5侵染组在4 h[(41.896 ± 0.575)、(38.561 ± 0.305)ng/L]、8 h[(38.943 ± 0.097)、(38.159 ± 0.236)ng/L)时IL-6的表达量明显增加(P均< 0.05);与对照组[(341.365 ± 14.672)、(382.235 ± 11.151)ng/L]比较, 布鲁菌16M和M5侵染组在4 h[(414.865 ± 4.844)、(447.035 ± 12.409)ng/L]和8 h[(435.445 ± 3.684)、(453.594 ± 4.942)ng/L]时IL-12的表达量明显增加(P均< 0.05)。且在侵染4 h时, 16M侵染组IL-6的表达量明显高于M5侵染组(P < 0.05)。各侵染时间IL-1β的表达量组间比较差异无统计学意义(P均> 0.05)。布鲁菌16M和M5侵入细胞的数量无明显差别, 但16M在细胞内存活及复制增殖的能力明显强于M5。结论布鲁菌16M在RAW264.7细胞内的存活能力强于M5, 通过测量不同布鲁菌在细胞内存活情况来鉴别其毒力强弱的方法具有可行性。

• 单位
  青海省地方病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所