摘要

目的 探讨米诺环素改性纯钛的抗菌性能及其对人骨髓间充质干细胞(hMSC)成骨分化的影响。方法 用聚多巴胺(PD)接枝米诺环素,用PD包被纯钛(Ti),将PD涂层的Ti片分别浸入100、200、500μg/mL米诺环素溶液中(100μg/mL组、200μg/mL组、500μg/mL组),制备米诺环素涂层Ti片(MHCI-Ti)。荧光光谱仪测定接枝的米诺环素,X射线光电子能谱表分析MHCI-Ti表面的化学成分,LIVE/DEADBacLaght染色检测细菌黏附能力。常规培养hMSC,并分别接种在抛光的Ti、MHCI-Ti(200μg/mL)上,于成骨培养基中培养。分别于培养第1、4、7天采用MTT法检测细胞活力,在成骨诱导后的第7、14、21、28天用荧光光谱仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,用茜素红染色法检测细胞钙沉积。结果 200μg/mL组米诺环素量高于100μg/mL组(P<0.05),200μg/mL组米诺环素量与500μg/mL组比较差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜图像显示,Ti和MHCI-Ti表面形态相似,MHCI-Ti表面的N1s(399 eV)峰的强度高于Ti表面,表明PD和米诺环素被成功覆盖。变形链球菌在样品上培养7 d,电镜下观察到大量的细菌簇,与MHCI-Ti相比,Ti表面附着的细菌多。激光共聚焦显微镜结果显示,Ti表面有一层明显的细菌层绿色细菌,MHCI-Ti表面有一层死亡的微生物层,其中200μg/mL组抗菌性能最高。与Ti比较,MHCI-Ti表面hMSC培养第4、7天活力高,培养第28天ALP活性高,培养第21、28天钙沉积高(P<0.05)。结论 MHCI-Ti抗菌性能高,且可促进hMSC成骨分化。