血管紧张素转换酶对淡色库蚊生殖的影响

作者：王欢; 刘进; 开力买·艾尼; 郑俊楠; 沈波; 孙艳; 周丹^*

来源：中国血吸虫病防治杂志, 2023, 35(03): 251-257.

DOI：10.16250/j.32.1374.2023031

• 淡色库蚊
• 血管紧张素转换酶
• RNA干扰
• 生殖

目的 探讨血管紧张素转换酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）在淡色库蚊（Culex pipiens pallens）生殖中的作用，为蚊媒种群控制靶标的选择提供科学依据。方法 淡色库蚊于2009年采集于山东省唐口县。选择羽化后72 h雌、雄蚊，采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time reverse transcription PCR,qPCR)技术检测雄蚊及吸血前（0 h）、吸血后（24、48、72 h）受精雌蚊全身和生殖组织中ACE基因表达水平。随后，选择羽化0～4 h的雌、雄库蚊各150只，分别分为野生（wild type, WT）组、RNA干扰-阴性对照（small interfering RNA-negative control group, siNC）组和RNA干扰-ACE (small interfering RNA-ACE group,siACE)组，每组50只。WT组淡色库蚊不作任何处理；siNC组和siACE组分别通过显微注射仪注射siNC和siACE至蚊血淋巴中，注射剂量为0.3μg/只。利用q PCR技术验证各组敲低效率，并观察各组生殖表型。结果羽化后72 h，雄蚊全身组织ACE表达量（5.467±1.006）高于雌蚊（1.199±0.241）(t=5.835, P=0.004)；雄蚊生殖组织中ACE表达量最高（199.100±24.429），为剩余组织（1.057±0.340）的188.3倍（t=6.602,P=0.002）。吸血触发ACE在受精雌蚊全身组织中高表达，吸血后24 h(14.957±2.815)达到表达量高峰，为未吸血时（1.009±0.139）的14.8倍（P=0.002）；雌蚊吸血后卵巢中ACE转录水平在卵黄合成期持续升高，在吸血后48 h(5.500±0.734)达高峰，是未吸血雌蚊（1.072±0.178）的5.1倍（P=0.002）。靶向ACE的小RNA干扰导致siACE组雌蚊中ACE表达量（0.430±0.070）较siNC组（1.002±0.070）降低57.2%(P=0.001),siACE组雄蚊ACE表达量（0.588±0.067）较siNC组（1.008±0.131）降低41.1%(P=0.016)。敲低ACE导致siACE组雌蚊产卵量[（94.000±27.386）只]较siNC组[（180.800±27.386）只]降低48.0%(P <0.001)；与siACE组雄蚊交配的野生雌蚊产卵量[（104.500±20.965）只]较siNC组[（190.050±10.698）只]降低45.0%(P <0.001)。结论 ACE表达降低可同时抑制雌、雄蚊虫生殖力，ACE可作为蚊媒种群抑制的潜在靶点。

• 单位
  南京医科大学; 基础医学院