基于PI3K/AKT信号通路及自噬探讨恒清Ⅰ号方治疗血管性痴呆的作用机制

作者：孟胜喜; 陈慧泽; 王兵; 李文涛; 潘卫东; 张云云

来源：现代中西医结合杂志, 2020, 29(35): 3877-3906.

DOI：10.3969/j.issn.1008-8849.2020.35.001

• 恒清Ⅰ号方
• 血管性痴呆
• PI3K/AKT信号通路
• 肿瘤坏死因子-α
• 核因子-κB

目的基于PI3K/AKT信号通路及自噬研究恒清Ⅰ号方治疗血管性痴呆的作用机制。方法将60只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、恒清Ⅰ号方低剂量组、恒清Ⅰ号方中剂量组、恒清Ⅰ号方高剂量组和欧来宁组,每组10只。除假手术组外,其余组均采用双侧颈总动脉永久性结扎法建模。术后7 d,恒清Ⅰ号方低、中、高剂量组分别给予0.268 g/mL、0.535 g/mL、1.070 g/mL的恒清Ⅰ号方灌胃,欧来宁组给予欧来宁14.8 g/kg灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃,均2次/d,持续灌胃30 d。灌胃结束后采用Morris水迷宫实验测试各组大鼠的逃避潜伏期、穿越平台次数,以ELISA法检测海马组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)含量,以Western blot法检测海马组织中PI3K、AKT、p-AKT、LC3-Ⅰ及LC3-Ⅱ蛋白表达情况。结果水迷宫实验第1～4天,模型组大鼠逃避潜伏期均明显长于假手术组(P均<0.05);恒清Ⅰ号方中、高剂量组和欧来宁组大鼠逃避潜伏期均明显短于模型组和恒清Ⅰ号方低剂量组(P均<0.05),且恒清Ⅰ号方高剂量组明显短于恒清Ⅰ号方中剂量组和欧来宁组(P均<0.05);模型组大鼠穿越平台次数明显少于假手术组(P<0.05),恒清Ⅰ号方中、高剂量组和欧来宁组大鼠穿越平台次数均明显多于模型组和恒清Ⅰ号方低剂量组(P均<0.05),且恒清Ⅰ号方高剂量组明显多于恒清Ⅰ号方中剂量组和欧来宁组(P均<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠海马组织中TNF-α、NF-κB含量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显增高(P均<0.05),PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达量均明显降低(P均<0.05);与模型组和恒清Ⅰ号方低剂量组比较,恒清Ⅰ号方中、高剂量组和欧来宁组大鼠海马组织中TNF-α、NF-κB含量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显降低(P均<0.05),PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达量均明显升高(P均<0.05);与恒清Ⅰ号方中剂量组和欧来宁组比较,恒清Ⅰ号方高剂量组大鼠海马组织中TNF-α、NF-κB含量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显降低(P均<0.05),PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达量均明显升高(P均<0.05)。结论恒清Ⅰ号方可以呈量效关系改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力,且高剂量恒清Ⅰ号方的作用优于欧来宁,可能与其抑制炎症反应、阻滞细胞自噬和调控PI3K/AKT信号通路有关。

• 单位
  上海市中医医院; 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院; 上海交通大学; 上海中医药大学附属曙光医院