核酸-免疫层析法快速检测肠道侵袭性大肠埃希氏菌

作者:赵雪龙; 夏伟诚; 刘道峰; 刘成伟; 山珊; 赖卫华*
来源:中国食品卫生杂志, 2022, 34(03): 524-530.
DOI:10.13590/j.cjfh.2022.03.020

摘要

目的 建立快速检测肠道侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)的核酸-免疫层析方法。方法 利用不对称聚合酶链式反应技术制备目标单链DNA,结合免疫层析技术分型检测EIEC的毒力基因invE和大肠埃希氏菌标志基因uidA。结果在不对称PCR体系中,uidA和invE最佳上下游引物比例为1∶3,最佳引物浓度(下游)分别为0.2μmol/L和0.25μmol/L,最佳扩增循环次数为40。本方法最低检测限为3.97×10-3ng/μL的基因组DNA,特异性与PCR-凝胶电泳法相当。结论 本方法具有操作简便、快速、成本低、检测结果准确以及特异性良好等优点,可分型检测EIEC、非EIEC大肠埃希氏菌和非大肠埃希氏菌,适用于基层实验室使用。

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