红笛鲷CD40和去除信号肽CD40的原核表达

作者：樊云霞; 简纪常; 鲁义善; 吴灶和

来源：广东海洋大学学报, 2013, (04): 31-37.

• 红笛鲷
• CD40基因
• 原核表达 Lutjanus sanguineus
• CD40
• prokaryotic expression

根据红笛鲷(Lutjanus sanguineus)CD40基因cDNA全长序列设计2对特异性引物,利用RT-PCR技术从红笛鲷头肾组织中扩增出CD40 ORF序列和去信号肽序列,分别与原核表达载体pET-32a(+)相连,构建原核重组表达质粒,命名为pET32-CD40和pET32-△CD40,并分别转化至大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,分别于54 ku和53 ku处有清晰的目的蛋白条带。融合蛋白的表达效率最佳的表达条件,pET32-CD40是诱导温度37℃,起始D(600nm)为0.4,IPTG浓度为0.08 mmol/L,诱导5 h;pET32-△CD40是诱导温度37℃,起始...

• 单位
  广东省教育厅; 仲恺农业工程学院; 广东海洋大学