三叶因子3对非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响

作者：张文静; 宋佳悦; 赵晓蕊; 张辰露; 余鸿杰; 张静^*

来源：河北北方学院学报(自然科学版), 2021, 37(08): 1-9.

• 三叶因子3
• 非小细胞肺癌
• 慢病毒转染
• 凋亡

目的探讨TFF3基因在非小细胞肺癌中的作用及其对凋亡的影响。方法免疫组织化学法检测组织芯片31例肺腺癌、21例肺鳞癌、10例正常肺组织TFF3表达阳性率;慢病毒包装TFF3基因ORF序列及TFF3-shRNA基因质粒、转染、嘌呤霉素筛选获得稳定过表达及沉默TFF3基因的A549细胞株;实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法验证TFF3基因和蛋白表达水平,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和信号通路分子Akt表达水平。流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果肺腺癌和鳞癌组织TFF3蛋白阳性表达率显著高于正常肺组织(P<0.05),Ⅲ级肺癌组织中TFF3阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ级(P<0.05),有淋巴结转移的肺腺癌和鳞癌组织中TFF3阳性表达率高于无淋巴结转移组织(P<0.01)。过表达TFF3的A549细胞(A549-TFF3)中TFF3基因及蛋白水平显著高于对照组,沉默TFF3基因的A549细胞(A549-shTFF3)中TFF3 mRNA及蛋白水平较对照组明显降低(P值均<0.01)。Western blot检测Bcl-2/Bax、p-Akt、p-Akt/Akt在A549-TFF3组显著高于对照组(P<0.01);在A549-shTFF3组Bcl-2/Bax、p-Akt表达水平显著低于对照组(P<0.01),p-Akt/Akt表达水平低于对照组(P<0.05),Akt表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞结果显示A549-TFF3细胞凋亡率较低(P<0.01),A549-shTFF3细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01)。结论非小细胞肺癌组织TFF3高表达,与病理分级及淋巴结转移有相关性。过表达TFF3在非小细胞肺癌细胞中可能通过激活Akt信号通路抑制肺癌细胞凋亡,促进肿瘤细胞恶性增生。

• 单位
  河北北方学院