调控硬膜淋巴系统减轻蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的实验研究

作者：刘全磊; 吴玉璋; 宋云飞; 彭超; 蔡仕飞; 赵岩^*

来源：中华神经外科杂志, 2022, 38(07): 730-735.

• 蛛网膜下腔出血
• 脑损伤
• 小鼠, 近交C57BL
• 血管内皮生长因子C
• 硬膜淋巴系统

目的通过调控硬膜淋巴系统(DL)的功能改善小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤, 探索硬膜淋巴管作为SAH后治疗靶点的可能性。方法实验采用C57BL/6J小鼠, 通过颈内动脉刺破法诱导小鼠SAH模型。设立假手术组、SAH模型组(SAH组)以及血管内皮生长因子(VEGF)C干预组(采用重组VEGF-C胶体干预后, 再进行SAH模型的诱导)。采用免疫荧光染色方法观察重组VEGF-C胶体干预10 d后DL的形态学变化, 并与胶体组(仅应用胶体, 不加重组VEGF-C)对比, 通过伊文思蓝引流实验验证DL的功能变化情况。比较3组小鼠SAH后的皮质脑血流灌注量、脑含水量, 以及神经功能损伤情况(以Garcia神经功能评分标准评估), 并通过蛋白质免疫印迹法检测各组凋亡蛋白Caspase-3的表达情况。结果与胶体组比较, VEGF-C干预组小鼠的DL生成了更多的淋巴管分支, 管腔直径也显著增大[胶体组为(24.8±4.8)μm, VEGF-C干预组为(31.2±3.9)μm, P<0.01], 同时引流至VEGF-C干预组颈深淋巴结中的伊文思蓝显色显著深于胶体组。与SAH组相比, VEGF-C干预组在SAH后早期脑损伤期的皮质血流灌注恢复更为显著, 脑含水量更低[分别为(76.7±1.6)%和(81.2±1.1)%, P<0.01], 神经功能受损更轻[Garcia评分分别为(10.7±1.3)分和(14.0±0.9)分, P<0.01];同时脑组织内凋亡蛋白caspase-3的表达水平也更低(分别为0.559±0.034和0.712±0.036, P<0.01)。结论通过调控DL的功能能够有效减轻小鼠SAH后的早期脑损伤。

• 单位
  天津医科大学总医院