釉基质蛋白诱导MC3T3-E1细胞成骨分化过程中微小核糖核酸的表达

作者：汪艳; 吴婷婷; 李静; 施琼玲; 黄慧

来源：口腔材料器械杂志, 2014, 23(04): 198-203.

• 微小核糖核酸
• 成骨分化
• MC3T3-E1细胞
• 釉基质蛋白

目的探讨微小核糖核酸(micro ribonucleicacid,mi RNA)是否参与到釉基质蛋白(Enamel Matrix Derivative,EMD)诱导的小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1细胞成骨分化的过程,并对发生显著变化的mi RNA进行分析。方法将MC3T3-E1用含EMD(刺激组)/不含EMD(对照组)的培养液培养0天、7天和14天,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析成骨分化标记物ALP、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨钙素(osteocalcin,OC)的信使RNA(m RNA)水平的表达变化。利用基因芯片技术分析mi RNA的相对表达。结果 0天、7天、14天的ALP染色结果显示随着培养时间的增加,两组ALP活性均逐渐增强,EMD刺激组ALP活性增强较对照组更为明显。RT-PCR结果表明,与对照组相比,ALP、BSP、OC的m RNA表达量均显著增加,ALP与OC均于14天时表达量达到峰值,BSP则于7天时处于峰值表达,EMD刺激组MC3T3-E1成骨活性更强;各期11个mi RNA表达上调,28个mi RNA表达下调,其中mi R-335-5p,mi R-503已被证实可参与促进骨形成,而mi R-30家族(mi R-30a,-30b,-30c和-30d)则被证实参与抑制成骨。结论 mi RNA参与EMD诱导的MC3T3-E1细胞的成骨分化过程,这一发现可以为了解EMD促进成骨分化的机理及临床应用提供指导。

• 单位
  首都医科大学; 上海交通大学医学院附属第九人民医院