化疗诱导的衰老细胞胞外囊泡的分离及相关特性研究

作者：周琦; 丁丽丽; 李芬; 刘爱国; 周学锋; 杨燕^*

来源：中国免疫学杂志, 2020, 36(15): 1800-1804.

DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2020.15.002

• 治疗诱导的衰老
• 胞外囊泡
• BRD4
• 巨噬细胞极化

目的:探讨化疗诱导的衰老肿瘤细胞分泌的胞外囊泡(EVs)特性及其对肿瘤细胞与巨噬细胞的影响。方法:化疗药物阿霉素、顺铂及极光激酶抑制剂MLN8237作用神经母细胞瘤细胞系,分析细胞衰老及细胞周期阻滞情况,建立化疗诱导的细胞衰老模型。分离衰老细胞培养上清中的EVs,Western blot及Nanosight分析EVs纯度、粒径大小与浓度。分别用肿瘤细胞及巨噬细胞孵育EVs,Western blot与RT-qPCR检测胞内蛋白与细胞因子表达。结果:低浓度MLN8237作用IMR32细胞成功诱导细胞衰老;衰老细胞分泌的EVs(SAEs)数量低于未处理细胞,但大小在30～150 nm的外泌体组分含量偏高;与EVs孵育组相比,SAEs孵育的IMR32细胞BRD4与C-MYC表达水平明显下调;EVs与SAEs孵育的THP-1细胞均发生形态改变:贴壁并伸出伪足,呈现极化状态;但THP-1细胞内细胞因子表达水平明显不同:在EVs与SAEs组,IL-4与TNF-α水平明显比未处理组低;与EVs组相比,SAEs组IL-1β、IL-10与TGF-β水平明显降低。结论:SAEs能够抑制肿瘤细胞BRD4表达并下调巨噬细胞分泌IL-10与TGF-β水平,有利于肿瘤预后,但具体机制还需要进一步研究。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院