丹酚酸B对乙醇诱导的HepG2细胞损伤的保护作用

作者：邱璐璐; 初君怡; 张宁^*

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(22): 3643-3646.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.22.017

• HepG2细胞
• 丹酚酸B
• 沉默信息调节因子2相关酶Ⅰ
• 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶组成的异源三聚体依赖的蛋白激酶α1

目的通过HepG2细胞体外实验探讨丹酚酸B通过调控AMPKα1/SIRT1通路减轻乙醇损伤的分子机制。方法实验1:HepG2细胞分为空白组、模型组、模型给药组、模型转染组、模型转染给药组。模型转染组和模型转染给药组转染AMPKα1 siRNA,模型给药组和转染后的模型转染给药组加入8μmol·L-1丹酚酸B,其他组加入等体积0.9%NaCl,3 h后,除空白组,其余4组加入100 mmol·L-1乙醇诱导48 h造模。实验2:HepG2细胞分为空白组、空白给药组、模型组、模型给药组。给药组加入8μmol·L-1丹酚酸B,空白组和模型组加入等体积0.9%NaCl,3 h后模型组和模型给药组加入100 mmol·L-1乙醇后孵育48h造模。实验3:HepG2细胞分为空白组、空白给药组、转染组和转染给药组。转染组和转染给药组转染AMPKα1 siRNA,空白给药组和转染给药组加入8μmol·L-1丹酚酸B,空白组和转染组加等体积0.9%NaCl。以MTT实验测定细胞存活率,以蛋白质印迹法检测AMPKα1、p-AMPKα1、SIRT1蛋白表达水平。结果实验1:空白组、模型组、模型给药组、模型转染组、模型转染给药组的细胞存活率分别为(100.00±1.58)%,(62.21±2.25)%,(81.65±4.16)%,(58.34±3.11)%,(61.64±3.24)%。模型组和空白组相比,模型给药组和模型组相比,模型转染组和模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。实验2:空白组、空白给药组、模型组、模型给药组细胞中p-AMPKα1/AMPKα1的蛋白表达相对量分别为1.00±0.02,1.35±0.13,0.26±0.08,0.71±0.01,空白给药组与空白组相比,模型组与空白组相比,模型给药组与模型组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。实验3:空白组、空白给药组、转染组、转染给药组细胞中p-AMPKα1/AMPKα1的蛋白表达相对量分别为1.00±0.01,2.31±0.15,0.56±0.05,0.60±0.04,SIRT1的蛋白表达相对量分别为1.00±0.02,2.14±0.20,0.43±0.06,0.46±0.04。空白给药组和空白组相比,转染组和空白组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论丹酚酸B通过调控AMPKα1/SIRT1通路发挥抗慢性酒精性肝病的保护作用。

• 单位
  大连医科大学附属第二医院; 大连医科大学