二茂铁位置异构对偶联阳离子多肽自组装行为及其抗菌效果的影响

作者：李奕捷; 王婧雯^*

来源：中国药房, 2023, 34(18): 2226-2232.

• 抗菌肽
• 自组装
• 同分异构
• 芬顿反应

目的 设计二茂铁(Fc)偶联阳离子多肽(以下简称“多肽”)的2种同分异构多肽[Fc-K(C8)FFHK、C8-K(Fc)FFHK]以及对照多肽[C8-K(C8)FFHK]，探究Fc位置异构对多肽自组装行为及其抗菌效果的影响。方法 采用标准固相合成法合成位置异构的多肽，采用反相高效液相色谱法进行纯化；采用紫外可见分光光度法检测紫外吸收光谱，Zeta电位分析仪测定Zeta电位以分析多肽的稳定性；采用圆二色光谱(CD)、傅里叶红外光谱(FTIR)、硫代黄素T(ThT)荧光光谱、透射电子显微镜(TEM)等进行二级结构表征；通过体外活性氧(ROS)生成效率实验、生长曲线法测定实验、平板法实验、细胞毒性实验和溶血性实验评价2种同分异构多肽在抗菌活性和生物相容性上的差异。结果 合成了3种纯度均高于95%的多肽。稳定性实验结果显示，室温下放置24、96 h时，Fc-K(C8)FFHK、C8-K(Fc)FFHK的紫外吸收图谱几乎没有改变，二者的Zeta电位分别减少了0.3、0.5 mV。二级结构表征结果显示，Fc-K(C8)FFHK、C8-K(Fc)FFHK分别自组装成扭曲纳米带和短纳米纤维结构，C8-K(C8)FFHK自组装成圆柱状纳米纤维结构；光学图谱结果显示，3种多肽的β-折叠、α-螺旋等结构含量具有一定差异。体外ROS生成实验结果显示，Fc-K(C8)FFHK在pH6.0时的ROS生成效率高于C8-K(Fc)FFHK。体外抗菌活性结果显示，对于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，2种同分异构多肽的最低抑菌浓度(MIC)值均为50μg/mL，远低于对照多肽的MIC值(400μg/mL)；对于大肠杆菌，Fc-K(C8)FFHK的抗菌活性优于C8-K(Fc)FFHK。细胞毒性实验和溶血性实验均结果显示，2种同分异构多肽均具有较好的生物相容性。结论 通过偶联Fc，能够提高多肽的抗菌活性；调节Fc在多肽序列中的位置，可调控多肽的自组装行为和抗菌效果。

• 单位
  上海交通大学; 中国人民解放军空军军医大学