摘要

AP2/ERF转录因子是植物特有的基因家族,广泛存在于各种植物中,参与逆境胁迫相关基因的调控表达。前期研究结果表明,EaDREB2B能够提高甘蔗的抗旱性,但关于EaDREB2B调控甘蔗抗旱的分子机制尚待阐明。本研究在前期研究基础上,构建了干旱胁迫下转EaDREB2B基因甘蔗GN18的酵母cDNA文库,拟利用酵母双杂交技术筛选EaDREB2B的互作蛋白,为阐明EaDREB2B调控甘蔗抗旱的分子机制奠定基础。结果表明,EaDREB2B的AP2/ERF结构域存在于N-端71-129AA区域,全长EaDREB2B存在自激活,自激活区位于EaDREB2B的C端255-325AA区域;使用了截短的EaDREB2B(1-255AA)作为诱饵蛋白对甘蔗cDNA文库筛选,初步筛选出498个候选阳性克隆,进一步PCR检测筛选到432个有效阳性克隆,经测序和比对去除重复克隆后,成功筛选出269个与其互作的候选蛋白,通过KEGG富集分析发现在光合作用、泛素介导蛋白水解和氨基酸生物合成等途径显著富集,推测EaDREB2B可能通过泛素化介导蛋白降解参与逆境响应。