基于CRISPR/Cas13a技术检测乙肝病毒DNA新方法的研究

作者：王萌; 周利; 张瑞; 李金明

来源：医学研究杂志, 2019, 1-5.

• 乙型肝炎病毒
• 核酸检测
• CRISPR

目的 建立一种基于CRISPR/Cas13a技术的乙型肝炎病毒即时核酸检测新方法。方法 将靶向乙肝基因组的Cas13a/crRNA复合物、报告RNA链与乙肝基因组共同孵育,crRNA特异性识别乙肝病毒基因组靶序列后,激活Cas13a的RNA酶活性,从而切割报告RNA链,释放荧光基团,进而通过荧光信号强度检测乙型肝炎病毒DNA;利用梯度稀释的乙型肝炎病毒血清标准物质评价该方法的特异性、灵敏度和重复性。结果这种基于CRISPR/Cas13a技术的乙肝病毒DNA检测方法高效快速,可在15分钟内出结果;可检出低至fmol级的乙型肝炎病毒DNA,灵敏度高,特异性好。结论 新建方法具有快速、灵敏、高效等诸...

• 单位
  卫生部临床检验中心; 北京医院; 北京协和医学院; 中国医学科学院