柚皮苷联合头穴针刺对脑缺血大鼠血管新生及Notch1/Akt/eNOS通路的影响

作者：陈悦; 王珍珍; 王文生·王月; 李喆^*

来源：现代中西医结合杂志, 2022, 31(16): 2218-2224.

• 柚皮苷
• 头穴针刺
• 脑缺血
• 血管新生
• Notch1/Akt/eNOS通路

目的 观察柚皮苷联合头穴针刺对脑缺血大鼠脑组织血管新生及Notch1/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路的影响。方法 将120只SD大鼠随机分组为假手术组、模型组、尼莫地平组、柚皮苷组、头穴针刺组和柚皮苷+头穴针刺组，每组20只。除假手术组外，其余组大鼠采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型。造模成功后，尼莫地平组给予尼莫地平混悬液12 mg/kg灌胃，柚皮苷组给予柚皮苷溶液80 mg/kg灌胃，头穴针刺组给予头穴针刺干预，柚皮苷+头穴针刺组给予柚皮苷溶液80 mg/kg灌胃和头穴针刺干预，假手术组及模型组给予等量生理盐水灌胃，各组均每天干预1次，连续干预7 d。干预结束后，记录各组大鼠神经功能评分，干/湿重法和TTC染色观察大鼠脑组织含水量及脑梗死体积，ELISA法检测大鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)水平，免疫组化法检测海马组织中VEGF阳性表达情况，Western blot法检测海马组织中Notch1、Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、eNOS、磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达情况，RT-PCR法检测海马组织中Notch1、p-Akt、p-eNOSmRNA表达情况。结果 模型组大鼠存在明显神经功能损伤及脑梗死，脑组织含水量、血清VEGF和VEGFR-2水平、海马组织中VEGF阳性表达数和Notch1蛋白及mRNA相对表达量均明显高于假手术组(P均<0.05),海马组织中p-Akt/Akt和p-eNOS/eNOS比值及Notch1、p-Akt、p-eNOS mRNA相对表达量均明显低于假手术组(P均<0.05)。与模型组比较，尼莫地平组、柚皮苷组、头穴针刺组和柚皮苷+头穴针刺组大鼠神经功能评分、脑含水量和梗死体积均明显降低(P均<0.05),且柚皮苷+头穴针刺组和尼莫地平组均明显低于柚皮苷组、头穴针刺组(P均<0.05);血清VEGF和VEGFR-2水平，海马组织中VEGF阳性表达数、p-Akt/Akt和p-eNOS/eNOS比值、Notch1蛋白及Notch1、p-Akt、p-eNOS mRNA相对表达量均明显增高(P均<0.05),且柚皮苷+头穴针刺组和尼莫地平组均明显高于柚皮苷组、头穴针刺组(P均<0.05);柚皮苷+头穴针刺组和尼莫地平组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 柚皮苷联合头穴针刺治疗可明显改善脑缺血大鼠神经功能，促进大鼠脑组织血管新生，其作用可能与激活Notch1/Akt/eNOS通路相关。

• 单位
  乌鲁木齐市中医医院; 中国人民解放军第二军医大学