TSA对不同糖浓度下小鼠海马神经元HT-22细胞凋亡的影响

作者：许雯; 许永劼; 刘歆蕾; 沈婕; 朱科静; 林海容; 李兴; 潘卫^*

来源：天津医药, 2021, 49(04): 349-353.

• 葡萄糖
• 糖尿病
• 脑疾病
• 海马
• 细胞凋亡
• 组蛋白脱乙酰基酶类
• 曲古抑菌素A

目的探究曲古抑菌素A(TSA)对不同糖浓度下小鼠海马神经元细胞系HT-22细胞凋亡的影响。方法分别用高糖培养基(葡萄糖浓度55 mmol/L)及普通培养基(葡萄糖浓度25 mmol/L)培养小鼠海马神经元HT-22细胞,高糖培养基及普通培养基各分为对照组(NC组)和抑制剂组(TSA组)。用1 mmol/L的TSA作用细胞1、4、8 h,同时用0.4 mmol/L的TSA作用细胞1、4、8、12、14、16、20、24 h,CCK8法检测细胞存活率,确定抑制剂最佳作用浓度和作用时间;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测组蛋白去乙酰化酶(HDAC)和组蛋白乙酰转移酶(HAT)活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达情况。结果以0.4 mmol/L、20 h为TSA处理HT-22细胞的最适条件;ELISA结果显示,TSA作用后,HDAC显著减少,HAT显著增加(P<0.05);流式细胞术结果显示,在TSA抑制20 h后,细胞凋亡率显著增加,高糖环境下加入TSA,细胞凋亡情况更加严重;TSA作用20 h后,Bcl-2表达显著下调,Caspase-3显著上调(P<0.05)。结论TSA可能通过抑制HDAC增加组蛋白乙酰化水平,导致小鼠神经元HT-22细胞的凋亡。

• 单位
  贵州中医药大学; 贵州医科大学; 公共卫生学院