大花蕙兰转齿兰环斑病毒外壳蛋白基因及检测

作者：彭博; 魏莉; 杨凯; 李潞滨

来源：林业科学研究, 2016, 29(02): 234-237.

DOI：10.13275/j.cnki.lykxyj.2016.02.013

• 大花蕙兰
• 齿兰环斑病毒
• 外壳蛋白基因
• 转基因
• 巢式PCR

[目的]通过植物转基因技术获得抗病毒大花蕙兰种质资源,优化转化体系和鉴定方法。[方法]本研究克隆了齿兰环斑病毒外壳蛋白基因,并构建了该基因的p BI121表达载体,用根癌农杆菌介导法转化大花蕙兰,尝试以巢式PCR方法检测转基因再生植株。[结果]优化了大花蕙兰遗传转化体系,建立了利用巢式PCR技术检测转基因大花蕙兰植株的方法,获得了32株转基因株(系)。[结论]优化了以类原球茎为外植体的农杆菌介导转化大花蕙兰的方法,确定以5%10%类原球茎存活时的抗生素(卡那霉素)浓度为筛选浓度;获得了转ORSV CP基因大花蕙兰植株;对大花蕙兰转基因植株检测时,巢式PCR较普通PCR更灵敏、准确。

• 单位
  林木遗传育种国家重点实验室; 北京农学院; 中国林业科学研究院林业研究所