摘要
目的:建立同时测定人血浆中15种胆汁酸的高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)方法,并分析不同抗凝剂对检测结果的影响。方法:血浆样本采用乙腈沉淀蛋白;采用Xterra RP18(4.6 mm×150mm,5μm)色谱柱,以乙腈-10 mmol·L-1醋酸按溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,进样10μL,采用电喷雾离子源(ESI)-三重四极杆质谱仪于负离子模式下进行多反应检测(MRM)。在该测定方法下,比较血清、肝素锂抗凝血浆及EDTA-K2抗凝血浆中15种胆汁酸的测定浓度。结果:15种胆汁酸在定量范围内线性关系良好,日内和日间精密度均<10%,低、中、高浓度提取回收率为71.2%~93.5%。用该方法同时检测血清、肝素锂抗凝血浆及EDTA-K2抗凝血浆中15种胆汁酸时,6名体检者血清、肝素锂抗凝血浆及EDTA-K2抗凝血浆中胆汁酸RE范围分别为-12.11%~4.67%、-13.08%~2.08%和-0.26%~15.46%。结论:该方法灵敏度高,专属性好,适用于人血中15种胆汁酸浓度的测定。建议使用血清或肝素锂抗凝血浆开展胆汁酸分型检测。
-
单位苏州大学附属第二医院