摘要

背景:九仙罗汉接骨汤具有活血散瘀、接骨消肿、止痛的作用,但目前其对胫骨骨折的具体作用机制尚未完全掌握。目的:探究苗药九仙罗汉接骨汤介导BMPs/Smad信号通路对胫骨骨折大鼠成骨分化及骨折愈合能力的影响。方法:60只SD大鼠随机分为模型组、苗药组、三七组,采用改良钻孔法建立不完全性胫骨骨折模型。造模成功当天,苗药组给予苗药九仙罗汉接骨汤煎剂(2 mL/kg)灌胃;三七组给予同体积三七粉液(1 mL/kg)灌胃;模型组给予同等计量蒸馏水灌胃,1次/d,共28 d。28 d后麻醉下取大鼠胫骨组织,茜素红染色测骨髓间充质干细胞成骨分化;三点弯曲试验测胫骨生物力学指标;苏木精-伊红染色测骨组织形态;ELISA检测血清中血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子1表达水平;RT-PCR和Western blot检测骨形态发生蛋白2、转化生长因子β、Smad1、Smad2的mRNA和蛋白水平;实验已经过贵州中医药大学第二附属医院动物伦理委员会批准(2018-072)。结果与结论:(1)与模型组比较,苗药组与三七组骨髓间充质干细胞成骨分化后细胞多层重叠生长且形成灶状,有大量的钙结节形成,且苗药组较三七组效果更佳;(2)与模型组相比,三七组与苗药组骨形态发生蛋白2、转化生长因子β、Smad1、Smad2的mRNA和蛋白水平均有所上升(P <0.05);(3)三七组与苗药组最大载荷、刚度水平较模型组均有所升高(P <0.05);(4)模型组骨小梁较细,髓腔间空隙大,杂乱无章,较为松散,有大量的未钙化软骨细胞;三七组与苗药组大鼠骨组织形态较为接近,均表现为骨小梁较粗,髓腔空隙减小,分布较为有序,软骨细胞骨化较多;(5)与模型组相比,三七组与苗药组血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子1表达水平有一定程度的提升(P <0.05);(6)模型组大鼠存在明显骨折线,三七组与苗药组标本骨折断端均达到完全愈合,但与三七组相比,苗药组标本骨折断端骨痂密度稍高;(7)结果说明,苗药九仙罗汉接骨汤可促进成骨细胞分化,加速骨折愈合,其作用机制可能是通过激活BMPs/Smad信号通路来实现。