大鼠胰岛细胞的分离培养与鉴定

作者：苏力担卡扎·仇曼; 林海; 何铁英; 程坤; 王松; 郝晓文; 陈启龙; 韩玮

来源：肝胆胰外科杂志, 2016, 28(05): 389-392.

• 胰岛细胞
• 分离
• 培养
• 鉴定
• 大鼠

目的探讨胰岛细胞的分离、培养与鉴定。方法从实验室中挑选出30只成年雄性大鼠,将胶原酶注入大鼠的胰腺导管,聚蔗糖梯度离心法分离胰岛细胞,并培养与鉴定胰岛细胞。培养1周后用双硫腙(DTZ)行胰岛细胞鉴定。用丫啶橙(AO)、碘丙啶(PI)检测胰岛细胞活性。结果经过分离与纯化,大鼠胰岛细胞的获得率较高且较稳定;分离后的胰岛细胞在适宜环境中生长,生长状态较佳,在培养后的1224 h可贴壁,在培养后45 d细胞生长状态达到顶峰,细胞完好,且折光性能优异。利用免疫组化法鉴定胰岛细胞,分离的细胞SMA及PDGFR表达呈阳性,少数细胞v WF表达呈阳性。结论我科此次分离纯化大鼠胰岛细胞的方法为逆行灌注胶原酶+原位消化+Ficoll液梯度分离法,实验结果显著,能在一定程度上获取纯度较高的大鼠胰岛细胞。分离后的胰岛细胞在培养45 d后达到最佳状态,适用于作为实验室胰岛细胞功能深入研究的实验材料。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院