摘要
目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大鼠胰岛瘤细胞(INS-1)增殖、凋亡、胰岛素分泌以及相关基因表达的影响。方法用不同浓度(0、40、80、160ng/mL)VEGF对大鼠INS-1细胞进行处理,采用CCK-8试剂盒检测INS-1细胞增殖,用AnnexinⅤ及碘化丙啶(PI)双染试剂检测细胞凋亡;INS-1细胞经VEGF处理后做标准葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验,ELISA法检测胰岛素,实时定量PCR技术检测胰岛分泌过程中相关基因表达,Western blot检测VEGF对Insulin蛋白表达的影响。结果不同浓度VEGF对INS-1细胞作用24h、48h、72h,其细胞活性均无明显变化(P>0.05)。但当VEGF浓度为80ng/mL和160ng/mL时对细胞凋亡具有抑制作用(P<0.01)。高糖状态下当VEGF浓度为40ng/mL时,VEGF对胰岛素的分泌具有抑制作用。不同浓度VEGF作用于INS-1细胞后,磺酰脲类受体基因(sulfonylurea receptor,Sur)、内向整流性钾离子通道基因(inwardly rectifying potassium channel 6.2,Kir6.2)的表达随VEGF浓度增高呈下降趋势,葡萄糖激酶基因(glucokinase,GCK)的表达先降低后升高,葡萄糖转运蛋白基因2(glucose transporter 2,Glut2)表达呈先升高后降低趋势,Insulin蛋白的表达量随VEGF浓度增高呈逐渐下降趋势。结论 VEGF在高糖状态下对细胞凋亡和胰岛素分泌有抑制作用,为探索VEGF在糖代谢中的作用提供了新的线索。
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单位四川大学华西医院; 生物治疗国家重点实验室