胡枝子高质量RNA的提取及ALMT基因片段的克隆和表达分析

作者：陈志长; 赵学强; 沈仁芳

来源：土壤, 2011, (03): 433-438.

DOI：10.13758/j.cnki.tr.2011.03.026

• 胡枝子
• 改良CTAB法
• RT-PCR
• ALMT基因
• 铝 Lespedeza bicolor
• Improved CTAB method
• ALMT
• Al

针对木本植物胡枝子组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点,采用改良的CTAB法,成功地从胡枝子组织中提取了总RNA。所提取的胡枝子总RNA OD260/OD280值介于1.9~2.1之间,产率介于100~250μg/g之间。采用该方法提取的胡枝子总RNA,经过RT-PCR成功地克隆到了胡枝子ALMT基因片段,克隆得到的胡枝子ALMT基因片段序列与已知ALMT基因序列之间具有较高同源性,经半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR表达分析,证明该基因在根中表达且受铝诱导。试验结果表明利用改良的CTAB法提取的胡枝子总RNA样品质量较高,能够用于基因的半定量和定量表达分析。

• 单位
  中国科学院研究生院; 土壤与农业可持续发展国家重点实验室; 中国科学院南京土壤研究所