摘要
目的:探讨橙黄决明素对脂多糖(LPS)诱导的大鼠软骨细胞骨关节炎(OA)模型的抗炎和软骨保护作用。方法:体外分离培养大鼠关节软骨细胞。通过LPS诱导建立体外软骨细胞OA模型。实验分为对照组、模型组、实验组。通过MTT法检测橙黄决明素的细胞毒性,通过钙黄绿素-AM/碘化丙啶(Calcein-AM/PI)、苏木精-伊红(HE)、番红O染色检测软骨细胞的增殖、形态、蛋白多糖的分泌,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法分析相关基因的表达。结果:橙黄决明素能够促进软骨细胞的增殖且浓度为2. 5μg/mL时增殖作用最明显(P<0. 01)。与对照组相比,模型组用LPS诱导后,细胞活力明显降低(P<0. 001),细胞形态表现为细长的类成纤维细胞样,蛋白多糖分泌量减少,软骨特异性基因软骨蛋白聚糖(ACAN)、Ⅱ型胶原纤维α1(COL2A1)的表达显著下调而炎症相关基因基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-4、ADAMTS-5、白介素(IL)-1、IL-6、环氧化酶-2(COX-2)的表达显著上调(均P<0. 05)。与模型组相比,实验组用橙黄决明素处理后,细胞活力明显提高(P<0. 001),细胞形态逆转为多边形或椭圆形,蛋白多糖分泌量增多,软骨特异性基因的表达显著上调而炎症相关基因的表达显著下调(均P<0. 05)。结论:橙黄决明素在LPS诱导的软骨细胞中发挥抗炎和软骨保护作用,其可能成为治疗OA的潜在替代药物。
- 单位