摘要
目的 探究温肾养血方改善自然衰老雌鼠卵巢颗粒细胞及卵母细胞质量的作用机制。方法 使用随机数表法将40只8月龄ICR雌鼠随机分为A:自然衰老组、B:控制性超排卵组(controlled ovarian hyperstimulation, COH)组、C:温肾养血低剂量组、D:温肾养血高剂量组,连续定时给药10d, B、C、D组雌鼠于第11天腹腔注射孕马血清促性腺激素(pregnant mareserum gonadotropin, PMSG),A组注射等量0.9%生理盐水,48h后,腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, hCG),16h后取高龄雌鼠输卵管,分离其卵巢颗粒细胞及卵母细胞,检测氧化应激及线粒体功能等各项指标,评价各组小鼠卵巢颗粒细胞及卵母细胞质量,并采用高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)测定温肾养血方化学成分。结果 与自然衰老组相比,COH组卵母细胞和颗粒细胞线粒体膜电位明显下降(P<0.05),颗粒细胞α-酮戊二酸脱氢酶(α-ketoglutaric aciddehydrogenase, α-KGDH)和丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase, PDH)活性降低(P<0.05),卵母细胞和颗粒细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)水平降低(P>0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-px)水平降低(P<0.05)。与COH组相比,温肾养血低剂量和高剂量组卵母细胞和颗粒细胞线粒体膜电位均有所回升(P>0.05);高剂量组颗粒细胞PDH、α-KGDH活性升高并差异有统计学意义(P<0.05);低剂量和高剂量组卵母细胞和颗粒细胞ROS水平降低(P<0.05),SOD活性升高(P>0.05),GSH-px活性升高(P>0.05)。通过UPLC-Q-TOF/MS方法鉴定出78种化合物。结论 温肾养血方可通过改善线粒体功能、提高抗氧化能力从而改善自然衰老雌鼠卵母细胞和颗粒细胞质量。
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单位首都医科大学附属北京妇产医院