摘要
目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路在LX-2细胞活化中的作用及慈菇消脂方的干预机制。方法 体外培养人肝星状细胞LX-2,TGF-β1处理建立细胞活化模型。实验随机分组为空白对照组、TGF-β1诱导组即模型组(5ng/ml)、TGF-β1+含药血清组(6%)、TGF-β1+环靶明脂组(10μM),每组复设9孔,干预72h后,CCK8检测各组细胞增殖活力;Q-PCR和Western-blot检测各组细胞中Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA和蛋白的表达水平。结果 通过CCK8法确定慈菇消脂方最佳干预时间和最佳干预浓度是72h和6%含药血清。与空白对照组相比,模型组细胞活力升高(P<0.05),Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组相比,含药血清组细胞活力降低(P<0.01),Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);环靶明脂组细胞活力降低(P<0.01),Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。与含药血清组相比,环靶明脂组细胞活力降低(P<0.01),Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论 慈菇消脂方含药血清可以抑制LX-2细胞的增殖、活化,从而抗肝纤维化,其机制可能通过调控Hh信号通路相关蛋白表达。
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单位甘肃中医药大学; 第一临床医学院