基因捕获成体干细胞及鉴定的初步研究

作者：王明科; 邹仲敏; 罗成基

来源：山西医科大学学报, 2008, (02): 112-115+193.

• 基因捕获
• 成体干细胞
• 聚合酶链反应
• β-半乳糖苷酶 gene trapping
• adult stem cells
• polymerase chain reaction
• β-Gal

目的探讨基因捕获技术应用于成体干细胞的可行性。方法线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY,利用Lipofectamine2000转染包装细胞PA317,LacZ染色证明转染效率后,收集病毒上清,感染种植于24孔板的小鼠成肌干细胞系C2C12、人骨髓间充质干细胞(hBMSC)。为排除潮霉素B筛选的假阳性干细胞,以C2C12、hBMSC细胞基因组DNA为模板,PCR扩增ROSAFARY上LacZ部分序列(560 bp)进行鉴定。结果ROSAFARY脂质体转染PA317细胞后LacZ染色,400倍镜下可见2-5个蓝色细胞/视野。病毒上清感染种植于24孔板的C2C12和hBMSC,4 d后经La...

• 单位
  第三军医大学; 创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室