全自动二维液相色谱法测定甲氨蝶呤血药浓度及其临床应用

作者：刘加涛; 孙小珊; 宋帅; 苏涌; 夏泉^*

来源：中南药学, 2022, 20(02): 366-370.

• 二维液相色谱
• 甲氨蝶呤
• 血药浓度
• 治疗药物监测

目的 采用全自动二维液相色谱(2D-LC-UV)法快速测定甲氨蝶呤的血药浓度。方法 采用10%三氟乙酸去蛋白剂对样本进行前处理后取上清液直接进样，待测物在一维柱Aston SC2(C18，4.6 mm×25 mm，5 μm)上初步分离，通过中间柱Aston SN(苯基柱，4.6 mm×10 mm，5 μm)截取保留，最后转移到二维色谱柱Aston SX1(氰基柱，4.6 mm×75 mm，5 μm)上进一步分离、测定。一维流动相为甲醇-乙腈-10 mmol·L-1磷酸铵水溶液=1∶1∶10(V/V/V)，流速0.6 mL·min-1；二维流动相为水(含1.0 mmol·L-1磷酸氢二铵水溶液，磷酸调pH至7.40)-水(含1.0 mmol·L-1磷酸氢二铵水溶液，磷酸调pH至3.00)-甲醇-乙腈(16∶60∶10∶14)的混合体系，流速1.0 mL·min-1，柱温40℃；紫外检测波长304 nm。使用本方法监测2019年10月—2020年12月期间使用甲氨蝶呤治疗的48份样本的甲氨蝶呤血药浓度。结果 甲氨蝶呤可在10 min内完整出峰且无杂质干扰，在0.05～12.8 μmol·L-1与峰面积线性关系良好(r=0.9997)，方法学考察均符合要求。检测的48份甲氨蝶呤血药浓度样本中72.9%(35/48)的样本在标准曲线范围内，10.4%(5/48)的样本因使用剂量低未检出，另有16.7%(8/48)的样本使用大剂量甲氨蝶呤后血药浓度超出正常值上限。结论 本方法操作简单，灵敏度、专属性高，稳定性好，能够满足甲氨蝶呤用药后药物浓度监测及解救的需要。

• 单位
  安徽医科大学第一附属医院