人参芸苔素内酯合成关键酶Pg90B/724B基因克隆及其表达载体构建

作者:赵露; 周新芳; 李俊; 苑雪琪; 朱雅静; 邹季; 张建勋; 许永华*
来源:分子植物育种, 2020, 18(12): 3932-3936.
DOI:10.13271/j.mpb.018.003932

摘要

为阐明内酯合成关键酶Pg90B/724B基因在人参芸苔素内酯合成途径中的作用,本研究根据人参转录组数据中90B/724B开放阅读框序列分析设计特异引物,用PCR克隆基因,并命名为Pg90B/724B。克隆载体选用p MD-19T,经大肠杆菌DH5α转化,双酶切验证及测序确定目标序列正确;将目的基因与PRI-201-AN载体构建重组DNA pRI-201-AN-Pg90B/72B,电击法转化农杆菌LBA4404,经PCR扩增后、鉴定pRI-201-AN-Pg90B/72B成功转化农杆菌。本研究成功构建重组DNA pMD-19T-Pg90B/724B和pRI-201-AN-Pg90B/724B,为进一步深入研究人参多茎形态的形成机制提供科学依据。