摘要
目的 研究口腔癌前病变细胞中尼古丁诱导α3n AChR和α7nAChR表达及与Prx1的相互作用,探讨尼古丁在口腔癌前病变中的作用机制。方法 利用Discovery Studio 2016软件预测α3nAChR和α7n AChR与Prx1是否存在直接结合,在体外培养的口腔癌前病变DOK细胞中进行验证。细胞分为尼古丁组(1μmol/L尼古丁处理7 d)和对照组(无任何处理),利用Co-IP和Western Blot检测细胞中Prx1与α3nAChR或α7nAChR的结合。采用α-BTX阻断α7nAChR受体,Western Blot检测尼古丁诱导Prx1结合蛋白GTPBP4和DIRAS2的表达。结果 尼古丁可诱导DOK细胞α3nAChR、α7nAChR、Prx1及其结合蛋白GTPBP4和DIRAS2表达增高。软件预测α3nAChR和α7nAChR均可能通过氢键和疏水键与Prx1直接结合,但是在DOK细胞中未检测到Prx1与α3nAChR或α7nAChR的结合。α-BTX特异性阻断α7n AChR对DOK细胞中GTPBP4和DIRAS2的蛋白水平无明显影响(P> 0.05)。结论 尼古丁可诱导口腔癌前病变细胞α3nAChR、α7n AChR、Prx1及其结合蛋白GTPBP4和DIRAS2表达增高;α7nAChR对Prx1的调控并非通过两者直接结合发挥作用,且亦非通过GTPBP4、DIRAS2介导完成。
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