工业谷氨酸棒杆菌电转化整合效率的优化

作者：王慧梅; 黄勤勤; 梁玲; 黄钦耿; 吴松刚; 黄建忠^*

来源：生物资源, 2018, 40(05): 412-418.

DOI：10.14188/j.ajsh.2018.05.005

• 谷氨酸棒杆菌
• 感受态细胞
• 电转化
• 整合

研究不同因素对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)电转化效率的影响,探讨电转化的最适条件,提高电转化效率。以产L-异亮氨酸的谷氨酸棒杆菌工业菌株a11为受体菌,大肠杆菌(Escherichia coli)JM109及质粒pk18mobsac B为载体,通过电转化方法研究了菌体最佳感受态性能、复苏培养基高渗溶液浓度、最适电场强度及电击后的热激培养对电转化效率的影响。对于谷氨酸棒杆菌a11而言,使用无痕的自杀载体电击转化,在感受态细胞OD600 nm值为1.01.2,电场强度达到9.0 kV/cm,电转后46℃热激培养8 min,而且热激后继续保持37℃的适应性培养,电转化效率最高,达到1.8×103cfu/μg DNA。实现了工业谷氨酸棒杆菌的电转化效率的提高,也为其它谷氨酸棒杆菌电转化效率的提高提供参考方法。

• 单位
  生命科学学院; 福建师范大学