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摘要
DNA加合物的分析鉴定是DNA损伤等研究的重要技术手段。不同的DNA水解方法可获得碱基、核苷、核酸片段等产物形式，各有优势以及适用的分析目的。以经典烷基化试剂芥子气为模型化合物，进行溶液孵育与动物染毒实验，采用加热水解、酸水解以及酶解等三种常用DNA水解方式，利用质谱技术对产物进行筛查与定量分析，系统比较了DNA加合物分析鉴定中常用的水解方法对于不同分析样本、不同加合形式的加合物水解效率的影响。结果表明不同修饰位点的DNA加合物稳定性存在差异，鸟嘌呤与腺嘌呤的N位点加合物结构较稳定，鸟嘌呤O6位点加合物则对酸、热不稳定。三种方式中加热水解法的水解效率较低；酸水解法则高效稳定，其产率较前者可提高10.4%-94.9%，产物中碱基形式占比>99%，较适用于已知结构DNA加合物的高通量、高灵敏质谱定量分析；酶解法可产生碱基与核苷等多种形式、产物信息丰富，适用于新结构以及未知结构加合物的筛查与鉴定，但因其酶解效率受DNA加合位点、基质效应与酶解条件等因素限制，易影响加合物的定量准确性。
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单位药物研究所; 中国人民解放军军事科学院
