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摘要
目的研究不同照射时间下核黄素-紫外线A巩膜胶原交联术对兔视网膜的影响, 寻找照射的安全时间。方法采用随机数表法将60只健康成年新西兰大白兔随机分为对照组(0 min组)和照射10、20、30及40 min组, 每组12只, 均取左眼进行核黄素-紫外线A巩膜胶原交联照射(370 nm, 10 mW/cm2)。采用光学显微镜和透射电子显微镜观察并比较各组视网膜病理组织学改变;采用生化反应试剂盒检测并比较各组视网膜组织中丙二醛(MDA)浓度及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;采用Western blot法检测并比较各组视网膜组织中SOD、CAT蛋白表达水平。结果光学显微镜下观察到对照组视网膜各层结构排列有序, 照射10 min组与对照组相比无明显变化, 随着照射时间的延长, 视网膜结构损伤逐渐加重。透射电子显微镜下可见对照组光感受器细胞外节膜盘层状结构完整, 光感受器细胞内节线粒体结构完整, 线粒体嵴结构连续, 照射10 min组与对照组相比无明显变化, 随着照射时间的延长, 视网膜结构损伤逐渐加重。各组视网膜组织中MDA浓度随着照射时间的延长逐渐升高, 总体比较差异有统计学意义(F=65.25, P<0.05), 其中照射20 min、30 min、40 min组MDA浓度分别为(11.31±1.84)、(14.94±1.04)和(18.25±1.42)nmol/mgprot, 明显高于对照组的(1.13±0.02)nmol/mgprot, 差异均有统计学意义(均P<0.05);照射20 min、30 min、40 min组MDA浓度依次升高, 两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。随着照射时间的延长, 视网膜组织中SOD、CAT和GSH-Px活性及SOD、CAT蛋白相对表达量均逐渐降低, 总体比较差异均有统计学意义(F=44.09、34.18、35.60、115.75、78.86, 均P<0.05), 其中照射20、30、40 min组与对照组比较, 照射20 min、30 min、40 min组两两比较, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 10 mW/cm2核黄素-紫外线A巩膜胶原交联照射兔眼10 min是安全的, 照射时间过长可引起视网膜损伤。
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