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摘要
目的 建立一种用于人干扰素γ药物生物学活性测定的报告基因法，以提高人干扰素γ药物生物学活性测定的生物安全性、简便性和精密度。方法 构建含有人干扰素γ反应性DNA元件和报告基因的转基因细胞，建立使用该细胞测定人干扰素γ药物生物学活性的报告基因法，进行方法学验证，评价其与细胞病变抑制法测定结果的一致性。结果 构建了含有干扰素γ活化位点和荧光素酶报告基因的转基因HeLa细胞，建立了人干扰素γ药物生物学活性的测定方法，该方法的剂量反应曲线符合四参数Logistic曲线，具有良好的专属性，3批样品的加标回收率在80%～120%之间，试验内变异系数小于8%,试验间变异系数小于11%,操作人员间变异系数小于15%,细胞代次、细胞接种密度和药物作用时间等试验条件的变化对测定结果无显著影响，该方法与病毒抑制法的测定结果之间有很高的一致性。结论 建立的报告基因法不需要使用病毒，操作简便，具有良好的专属性、准确度、精密度、耐用性，可作为病毒抑制法的替代方法，用于人干扰素γ药物生物学活性测定。
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单位中国食品药品检定研究院
