摘要

目的优化大鼠肾小管上皮细胞的培养方法,为肾脏疾病的体外研究提供一定的技术支持。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法结合Percoll密度梯度离心法,分离纯化肾小管节段,对肾小管节段进行贴壁培养,待上皮细胞爬出后,通过流式细胞仪分析细胞角质素-18(CK-18)的表达情况,并用免疫组化方法对CK-18在肾小管上皮细胞中的表达进行定位;通过不同剂量的维生素C作用,CCK-8方法分析大鼠肾小管上皮细胞的增殖活力改变。结果肾小管节段贴壁培养1-2天后,肾小管上皮细胞从节段内爬出,培养3-4天,细胞密集生长;随着传代进行,肾小管上皮细胞凋亡比例增加,增殖活力减弱,在维生素C的作用下,可在一定程度上减缓细胞的老化速度...

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