钙敏感受体过表达可促进缺血后未成熟脑白质祖细胞的增殖及分化

作者：毛凤霞; 雷梦园; 程欣茹; 张菊; 徐千雅; 时赞扬; 韩素鸽; 张茜^*

来源：中华神经医学杂志, 2021, 20(04).

• 钙敏感受体
• 脑白质祖细胞
• 少突胶质细胞前体细胞
• 未成熟脑
• 脑室周围白质软化

目的探讨钙敏感受体(CaSR)过表达对缺血后未成熟脑白质祖细胞增殖分化的促进作用。方法从5 d龄SD大鼠脑室周围白质组织中提取、培养脑白质祖细胞, 并分为对照组、氧糖剥夺(OGD)组、OGD+三氯化钆(GdCl3)组和OGD+CaSR沉默组, 其中利用GdCl3特异性激动CaSR表达, 利用基因沉默方式抑制CaSR表达。OGD后24 h、48 h、72 h、7 d和14 d, 采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中CaSR mRNA水平, 采用免疫荧光双标染色检测各组细胞的分化情况;OGD后48 h细胞球形成时, 利用倒置显微镜检测细胞增殖情况。结果 (1)CaSR mRNA表达情况:OGD后48 h、72 h、7 d, OGD组细胞内CaSR mRNA表达量均明显高于对照组, 差异有统计学意义(P<0.05)。OGD后48 h、72 h、7 d及14 d, OGD+GdCl3组CaSR mRNA表达量均明显高于对照组及OGD组, OGD+CaSR沉默组CaSR mRNA表达量均明显低于对照组及OGD组, 差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)细胞增殖分化情况:OGD后48 h时, OGD组细胞球直径[(75.26±26.07) μm]较对照组[(57.96±18.92) μm]明显增大, OGD+GdCl3组细胞球直径[(91.92±21.82) μm]较对照组及OGD组明显增大, 而OGD+CaSR沉默组细胞球直径[(24.09±8.34) μm]较对照组及OGD组明显减小, 差异均有统计学意义(P<0.05)。OGD后48 h、72 h时, OGD组中O4+/CaSR+少突胶质细胞前体细胞(OPCs)数目明显高于对照组, OGD+GdCl3组中O4+/CaSR+OPCs数目明显高于对照组及OGD组, OGD+CaSR沉默组中O4+/CaSR+OPCs数目明显低于对照组及OGD组, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CaSR过表达可进一步促进脑白质祖细胞增殖及分化为OPCs。

• 单位
  郑州大学第一附属医院