NF-κB通路参与邻苯二甲酸二丁酯诱导U251细胞毒性的作用研究

作者：梁冯; 王泽夏; 晏彪^*

来源：环境科学学报, 2019, 39(02): 640-648.

DOI：10.13671/j.hjkxxb.2018.0305

• 邻苯二甲酸二丁酯
• U251细胞
• 氧化应激
• NF-κB
• 神经毒性

为探究nuclear factor-κB （NF-κB）通路及其分子事件相关蛋白参与邻苯二甲酸二丁酯（dibutyl-phthalate, DBP）诱导神经毒性的作用机制,以人胶质瘤细胞U251为对象,设置6个实验组:Control组,Tween 80组（阳性对照组）、25μmol·L-1 DBP组、100μmol·L-1 DBP组、20μmol·L-1维生素E （vitamin E, VE）组、100μmol·L-1 DBP+20μmol·L-1 VE组.U251细胞经不同处理组分别暴露12 h及24 h后,观察细胞形态学结晶紫染色结果,检测细胞活性（CCK-8）、活性氧（reactive oxygen species, ROS）、丙二醛（malondialdehyde, MDA）、氧化应激转录因子NF-κB,以及NF-κB通路相关蛋白钙调神经磷酸酶（calcineurin, CaN）、泛素特异性蛋白酶14（ubiquitin-specific protease 14, USP14）、胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF）的表达水平.与对照组相比,100μmol·L-1 DBP组U251细胞的数量降低,细胞损伤,CCK-8降低,ROS、MDA含量显著升高,NF-κB水平显著升高,CaN、USP14表达均升高,GDNF表达降低,差异均有统计学意义（p<0.05,p<0.01）;加入抗氧化剂VE处理后,与100μmol·L-1 DBP组相比,100μmol·L-1 DBP+20μmol·L-1M VE组U251细胞的数量增多,细胞损伤得到缓解,CCK-8上升,ROS、MDA含量显著降低,NF-κB水平显著降低,CaN、USP14表达均降低,GDNF表达增加,差异均有统计学意义（p<0.05,p<0.01）.NF-κB和NF-κB通路相关蛋白的水平或含量变化表明,NF-κB作为氧化应激转录因子参与DBP诱导的U251细胞毒性作用;VE作为抗氧化剂可阻断ROS的生成从而抑制NF-κB的活化,提示VE在体外对DBP介导的神经毒性具有一定的保护作用.

• 单位
  湖北科技学院; 湖北中医药大学