甲型副伤寒结合疫苗人免疫血清破伤风类毒素抗体亲和力的检测与分析

作者：张钰奇; 杨英英; 杨田瑶; 魏开琦; 王欣茹; 罗树权; 谭小梅; 李阿妮^*

来源：微生物学免疫学进展, 2022, 50(05): 33-39.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2022.05.007

• 抗体相对亲和力
• 破伤风类毒素
• 甲型副伤寒结合疫苗
• 硫氰酸钾
• 离散剂
• 酶联免疫吸附试验

目的 建立甲型副伤寒结合疫苗人免疫血清中破伤风类毒素(tetanus toxoid, TT)抗体亲和力的检测方法，探究甲型副伤寒结合疫苗免疫人体后，免疫系统对载体蛋白质TT的亲和力成熟情况，并分析与免疫后抗体含量增长情况的关系。方法 采用间接ELISA检测甲型副伤寒结合疫苗免疫前后血清中TT抗体含量，利用硫氰酸钾(potassium thiocyanate, KSCN)洗脱测定抗体亲和力。检测免疫后抗体含量高增长倍数组(免疫后相比免疫前抗体含量增长>10倍)和低增长倍数组(免疫后相比免疫前抗体含量增长<2倍)血清，计算相对亲和力指数。结果 KSCN洗脱对TT与酶标板之间的物理性吸附没有影响(P>0.05)。KSCN的最适洗脱浓度为3.1 mol/L。对于高抗体含量增长倍数组，免疫后相比免疫前抗体亲和力明显成熟，免疫前与免疫后抗体亲和力差异有统计学意义(P=0.005 0,P<0.05),对于低抗体含量增长倍数组免疫后抗体亲和力成熟不明显，免疫前与免疫后抗体亲和力差异无统计学意义(P=0.852 2,P>0.05)。结论 KSCN可用于甲型副伤寒结合疫苗人免疫血清抗体亲和力测定，结果真实、可靠。用单一KSCN浓度洗脱法测定抗体含量差别较大的血清抗体亲和力进行了尝试，免疫前和免疫后血清抗体亲和力都能被良好地测定。对免疫后亲和力明显成熟的高抗体含量增长倍数组，免疫后抗体含量的增长很大程度上依赖于其中高亲和力抗体的增长。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司