αA晶体蛋白在缺氧状态下对视网膜的血管内皮细胞血管生成作用

作者：郑嘉琳; 吴绵绵; 张琰; 张红; 孙靖; 石怡^*

来源：兰州大学学报(医学版), 2018, 44(05): 37-43.

DOI：10.13885/j.issn.1000-2812.2018.05.007

• αA-晶体蛋白
• 细胞增殖
• 迁移
• 管腔成形
• 缺氧

目的拟在体外用氯化钴处理猴视网膜血管内皮细胞系RF/6A,以模拟细胞缺氧微环境,检测αA-晶体蛋白(CRYAA)的表达是否导致缺氧环境下RF/6A细胞的行为学改变,验证CRYAA对细胞血管生成的影响。方法采用实时荧光定量PCR从3种序列不同的小干扰RNA (siRNA)中筛选能有效抑制CRYAA表达的siRNA,并通过蛋白印迹实验检测CRYAA蛋白水平的表达情况;分别采用细胞计数试剂盒-8、Transwell实验和Matrigel实验检测降低CRYAA表达对缺氧诱导的RF/6A细胞的增殖、迁移及管腔形成的作用。结果缺氧环境下,RF/6A细胞中CRYAA的基因表达较正常对照组显著上调,而仅有siRNA945可抑制CRYAA的表达上调,差异有统计学意义(P <0.01)。蛋白印迹法验证了各组CRYAA在蛋白水平的表达趋势与核酸水平一致。单纯缺氧环境能诱导RF/6A细胞增殖、迁移及管腔成形的能力增加,而siRNA945可大幅度降低缺氧所诱导的内皮细胞血管生成能力的增强,差异有统计学意义(均P <0.001)。结论在氯化钴模拟的缺氧微环境下,敲减CRYAA可显著抑制缺氧所诱导的视网膜血管内皮细胞的血管生成能力。

• 单位
  天津医科大学眼科医院