摘要
目的观察不同信号肽对重组胰高血糖素样肽-1(GLP-1)分泌的影响,筛选高效表达GLP-1的信号肽。方法构建GFP-GCG-GLP-1、GFP-NT4-GLP-1、GFP-EX4-GLP-1重组质粒,根据信号肽不同分为阴性对照(NC)、空载、EX4、NT4和GCG组。使用Vigofect试剂盒转染HEK293T细胞;RT-PCR分析转染后HEK293T细胞GLP-1 mRNA表达水平;ELISA法测定转染后培养基上清液中GLP-1水平。结果转染24 h后HEK293T细胞,检测EX4、NT4、GCG组GLP-1mRNA水平差异无统计学意义,与NT4、GCG组比较,培养基上清液中EX4组GLP-...
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单位安徽医科大学第三附属医院