结核分枝杆菌WhiB2蛋白的表达纯化及理化性质和生物信息学分析

作者：张博; 杨晨光; 付博; 郭法谋; 孙红宾^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2023, 43(10).

• 结核分枝杆菌
• WhiB2
• 细胞分裂
• 核磁共振
• 铁硫簇
• 蛋白质-DNA相互作用

目的探索结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)WhiB2蛋白的作用机制。方法构建Mtb中pET28a-WhiB2重组表达载体, 异源表达并纯化WhiB2蛋白和包涵体WhiB2蛋白;圆二色谱和核磁共振分析包涵体WhiB2与非变性WhiB2蛋白的差异;加入Fe2+恢复WhiB2蛋白的铁硫簇;核磁谱图分析WhiB2与WhiBMtb基因上游的启动子序列相互作用;生物信息学分析其三级结构、三级结构比对和相互作用蛋白质。结果复性的WhiB2与非变性WhiB2的结构基本一致, 在破坏了铁硫簇的WhiB2中加入Fe2+能够成功恢复自身的铁硫簇, WhiB2可以与WhiBMtb/WhiB2Ms基因上游的启动子序列结合。结论 Mtb WhiB2蛋白在结核病发病机制中起关键作用, 为进一步探索抗Mtb的新型靶点提供基础资料。

• 单位
  郑州轻工业大学; 食品与生物工程学院