新型冠状病毒数字PCR检测方法建立

作者：李彤; 荆福祥; ***; 邢晓星; 赵金银; 程迪; 曲守方^*; 刘琦^*

来源：分子诊断与治疗杂志, 2020, 12(07): 843-847.

DOI：10.19930/j.cnki.jmdt.2020.07.002

• 新型冠状病毒
• 严重急性呼吸综合征
• 数字PCR

目的研究和建立一种数字PCR检测方法,用于检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的核酸RNA。方法建立使用一步法逆转录聚合酶链扩增法(RT-PCR)的数字PCR检测方法。然后使用假病毒质粒参考品对检测方法的准确性、灵敏度进行评价;使用其他病毒和健康人核酸RNA样本,进行特异性评价;临床新型冠状病毒肺炎患者的核酸RNA进行临床适用性评价,同时与荧光定量PCR方法进行比较。结果建立了新型冠状病毒的数字PCR检测方法,假病毒质粒参考品均能准确检出,灵敏度为50 copies/mL;其他病毒和健康人核酸RNA样本均为阴性;临床新型冠状病毒肺炎患者的核酸RNA均能准确检出。经过比较,数字PCR检测方法检测灵敏度为50 copies/mL,荧光定量PCR法的灵敏度为100copies/mL。结论本研究建立的新型冠状病毒数字PCR检测方法具有较高准确性、灵敏度、特异性和临床适用性,能够改善临床新型冠状病毒核酸检测的假阴性问题。

• 单位
  济宁医学院; 中国食品药品检定研究院