摘要

目的探讨艾拉莫德增强丝裂霉素C(MMC)诱导的人食管癌Eca109细胞凋亡的作用及其机制。方法将人食管癌Eca109细胞分为五组:对照组、MMC组、25,50,100μg/ml浓度艾拉莫德+MMC组;通过CCK-8和DCFH-DA染色法分别检测25,50,100μg/ml浓度艾拉莫德联合MMC对人食管癌Eca109细胞活力和细胞活性氧(ROS)生成的影响,流式细胞术检测艾拉莫德联合MMC对人食管癌Eca109细胞凋亡的影响,并通过Western Blot检测艾拉莫德联合MMC对TNF-α和cleaved caspase3蛋白表达的影响。采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果 CCK-8结果显示,与0μg/ml T-614+MMC组A450值(0.85±0.03)比较,25、50、100μg/ml T-614+MMC组A450值(0.73±0.02,0.52±0.02,0.33±0.02)均降低,差异具有统计学意义(F=127.60, P <0.01);DCFH-DA染色检测结果显示,与0μg/ml T-614+MMC组DCFH荧光值(130.00±10.00)比较,25、50、100μg/ml T-614+MMC组DCFH值(219.67±9.50,280.33±10.50,338.33±16.07)均升高,差异具有统计学意义(F=170.20,P <0.01);流式细胞术检测结果显示,与对照组的细胞凋亡率(5.33±0.35)﹪比较,T-614和MMC组的凋亡率(20.30±2.00)﹪,(25.60±3.00)﹪均升高。与MMC组细胞凋亡率(25.60±3.00)﹪比较,艾拉莫德与MMC联用组(T-614+MMC)食管癌Eca109细胞的细胞凋亡率(56.20±3.00)﹪升高,差异均具有统计学意义(F=247.50,P <0.01);Western Blot结果显示,与MMC组细胞TNF-α和cleaved caspase3蛋白表达(0.87±0.06,0.25±0.03)比较,艾拉莫德与MMC联用组(T-614+MMC)食管癌Eca109细胞的TNF-α和cleaved caspase3蛋白表达(1.28±0.08,0.59±0.03)升高,差异均具有统计学意义(F=96.90,P <0.01)。结论艾拉莫德能够增强MMC对食管癌Eca109细胞活力的抑制作用,其机制可能通过促进ROS的生成,激活线粒体凋亡通路,最终导致食管癌Eca109细胞凋亡。