链霉菌FJS31-2 abxR2基因克隆表达及蛋白纯化

作者：李泽鑫; 王兰林; 栗午娟; 杨逸; 张悦萌; 高佩舒; 田红英; 岳昌武^*

来源：化学与生物工程, 2023, 40(12): 34-38.

• 链霉菌
• AbxR2
• 基因簇
• 原核表达
• 蛋白纯化

利用原核表达系统获得链霉菌FJS31-2 AbxR2重组蛋白，并进行纯化。通过PCR扩增abxR2基因，将扩增产物克隆至pET32a质粒上构建重组质粒pET32a-abxR2;将重组质粒转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达，并通过尿素洗涤方式对AbxR2重组蛋白进行纯化。酶切和测序结果均证实重组质粒pET32a-abxR2构建成功；在菌液OD600值为0.6、28℃、110 r·min-1、1.0 mmol·L-1 IPTG诱导4 h时，AbxR2重组蛋白的表达效果较好；采用尿素洗涤方式纯化AbxR2重组蛋白，可得到单一特异蛋白条带，效果较好。为研究AbxR2蛋白的结构和功能及提高Zunyimycins产量奠定了基础。

• 单位
  延安大学; 基础医学院